1、测定方法有以下几种：1.蒽酮法测定可溶性糖2.苯酚法测定可溶性糖3.3 ,5 –二硝基水杨酸比色法测定还原糖4.斐林试剂比色法测定还原糖斐林试剂比色法测定还原糖步骤一、原理 植物组织中的可溶性糖可分为还原糖（主要是葡萄糖和果糖）和非还原糖（主要是蔗糖）两类。

2、还原糖具有醛基和酮基，在碱性溶液中煮沸，能把斐林试剂中的 Cu 2+ 还原成 Cu + ，使蓝色的斐林试剂脱色，脱色的程度与溶液中含糖量成正比，在 590 nm 波长下比色测定吸光度，查标准曲线，即可计算出所测样品中还原糖的含量。

(资料图片)

3、本方法也可用于测定蔗糖及总糖含量。

4、 二、实验材料、试剂与仪器设备 （一）实验材料 新鲜植物样品或烘干粉碎过的植物样品。

5、（二）试剂 1. 斐林试剂 A 液： 40 g CuSO 4 · 5H 2 O 溶解于蒸馏水定容至 1000 mL 。

6、 2. 斐林试剂 B 液： 200g 酒石酸钾钠（ KNaC 4 H 4 O 6 · 5H 2 O ）与 150g NaOH 溶于蒸馏水中，并定容至 1000 mL 。

7、 A 、 B 两液分别贮存，使用前等体积混合。

8、 3. 0.1 ％葡萄糖标准液：取 80 ℃下烘至恒重的葡萄糖 0.1000 g ，加蒸馏水溶解，定容至 100 mL 。

9、 4. 0.1mol/LNaOH 。

10、 5. 甲基红指示剂： 0.1 g 甲基红溶于 250 mL 60 ％乙醇中。

11、 6. 10 ％ Pb(Ac) 2 。

12、 7. 饱和 Na 2 SO 4 。

13、（三）仪器设备 分光光度计，分析天平，离心机，水浴锅，具塞刻度试管，刻度吸管，容量瓶，研钵。

14、 三、实验步骤 1 . 标准曲线的制作 取 7 支试管，按表 24 – 4 分别加入各溶液。

15、 将以上各管混合后加塞，于沸水浴中加热 15 min 。

16、取出后自来水冷却， 1500 r/min 离心 15 min 。

17、取上清液，用分光光度计在 590 nm 波长下比色，以蒸馏水作对照，读取吸光度。

18、用空白管的吸光度与不同浓度糖的各管的吸光度之差为横坐标，对应的糖含量为纵坐标，绘制标准曲线。

19、 2. 样品中还原糖的提取 取新鲜的植物样品洗净、擦干、剪碎，称取 3.00 g ，放入研钵中研磨至糊状，用水洗入大试管中。

20、体积为 10 ～ 15 mL 时，加 2 ～ 3 滴甲基红指示剂，如呈红色，可用 0.1 mol/L 的 NaOH 中和至微黄色。

21、若用风干样品，可称取干粉 3.00 g ，先在烧杯中用少量水湿润，然后用水洗入 250 mL 容量瓶中，如显酸性，可用上法中和。

22、 将大试管置于 80 ℃的恒温水浴中保温 30 min ，其间摇动数次，以便将还原糖充分提取出来。

23、对含蛋白质较多的样品，此间可加 10 ％ Pb(Ac) 2 ，除去蛋白质，至不再产生白色絮状沉淀时，加饱和 Na 2 SO 4 除去多余的铅离子。

24、 30 min 后取出冷却，将提取液全部转入 100 mL 容量瓶中。

25、定容至刻度，摇匀后过滤待测。

26、 3. 样品测定 吸取 6 mL 待测液，加 4 mL 斐林试剂，其他操作与标准曲线相同，在 590 nm 波长下读取吸光度。

27、以不含样品的空白管的吸光度减去样品管的吸光度，在标准曲线上查出糖含量。

本文到此分享完毕，希望对大家有所帮助。